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Comment utiliser un Microscope inversé à Fluorescent

Comment utiliser un Microscope inversé à Fluorescent

Un microscope est un équipement standard dans un laboratoire scientifique et sert à amplifier les choses qui sont si petits qu'ils ne peuvent pas être facilement visible à l'oeil. Dans les laboratoires professionnels, cristaux microscopiques, puces d'ordinateur, cellules, tissus et micro-organismes même ensemble, peut être examiné sous un microscope. La surabondance de microscopes avancés, tels que les microscopes confocaux à balayage laser, a complexifié technique de microscopie. Microscopes inversés de fluorescents sont coûteux et nécessitent un entretien étendu et utilisation des compétences. Pour ces raisons, il est rare d'en trouver un en dehors de l'industrie professionnelle scientifique.

Instructions

• Se familiariser avec tous les termes scientifiques utilisés en microscopie et imagerie de fluorescence. Si vous êtes peu familier avec la microscopie avancée, de fluorescence et de terminologie scientifique, il est impératif que vous cherchiez des tutoriels ou des classes formelles en science. En outre, vous devez être familier avec les composants d'un microscope. La microscopie en fluorescence inversé est complètement inadaptée pour les débutants ou le profane.

• Mettez sous tension de la source lumineuse du champ lumineux, détection de signal de la caméra et la source de lumière UV pour fluorescence ultérieur. Placer un filtre bloquant ou foncé pour écarter la lumière UV jusqu'au prêt à l'emploi pour l'imagerie de fluorescence.

• Placez la diapositive contenant l'échantillon sur la scène et le fixer avec la diapositive épingles titulaire. La valeur du condensateur « Bright-Field » pour teinté ou histologie échantillons pour qu'ils soient visibles sous lumière blanche ou "contraste de Phase » pour les échantillons incolores. Recherchez l'échantillon à l'aide de l'oculaire.

• Pour réduire l'intensité lumineuse lumineux-zone, insérer ou modifier des filtres de densité neutre qui sont fournies avec le microscope. Ajuster à l'intensité lumineuse appropriée. Ajustez le grossissement de l'échantillon considéré en tournant lentement les boutons de réglage fin et grossier, jusqu'à ce que la résolution de l'échantillon est fine et claire. Il devrait y avoir aucune décoloration ou autres anomalies de la réfraction des rayons lumineux.

• Mettez l'appareil photo (dans la plupart des microscopes, il n'y a aucun moyen de le faire autre que lancer le logiciel) à quelque image logiciel de capture et d'analyse a été installé par le fabricant de l'ordinateur relié au microscope. Définir les paramètres d'échelle, grossissement, objectifs, etc.. Configurez le logiciel puis à « Live Imaging » dans « Bright-champ. »

• Lorsque l'échantillon est prêt, éteignez la source de lumière et allumez la source de puissance lumineuse fluorescente (UV). Encore une fois, faire des ajustements à l'intensité de puissance UV pour mettre vers le haut ou vers le bas le signal fluorescent de l'échantillon.

• Lorsque l'échantillon est prêt à être photographiés, passer le logiciel de « Live Imaging » à « Image Acquisition. » Définir la taille de l'ouverture appropriée, temps d'exposition, mise au point et autres paramètres requis. Remarque que quel que soit l'image est observée par l'oculaire sera pas identique à cela étant acquises par la caméra et lus sur les logiciels. Profonds ajustements de paramètres tels qu'intensité focus et fluorescence, sera toujours nécessaires.

Conseils et avertissements

  • Tous les microscopes diffèrent entre les fabricants, veuillez donc consulter les spécifications du fabricant ou à l'usine avant de commencer. Vérifier si les objectifs (lentilles) utilisés nécessitent un support d'immersion (huile, glycérol, eau ou tout ce qui est recommandé par le fabricant) et s'assurer que ceux-ci sont préalablement filtrées pour enlever le sable et les impuretés ou achetés frais et stérile. Se familiariser avec si la lumière est nécessaire pour le condensateur utilisé et ces valeurs sont définies convenablement. Encore une fois, différents microscopes ont des exigences différentes pour cela alors si vous avez des doutes, contactez le fabricant. Ne pas régler l'éclairage de Koehler sauf professionnellement formés pour le faire, car ces erreurs sont exceptionnellement difficiles à corriger.
  • La microscopie fluorescente n'est absolument pas une technique qui devrait être tentée par le profane ou débutant et certainement pas une personne qui n'est pas un scientifique qualifié. Le matériel est cher et contient des lasers et des sources d'énergie qui peuvent causer des dommages significatifs. Si vous n'êtes pas un professionnel scientifique, chercher l'éducation des personnes concernées et ne pas continuer jusqu'à ce que vous êtes confiant concernant l'utilisation de l'équipement.